本試劑盒僅供科研使用。用于體外定量檢測兔血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-1β濃度。使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書并檢查試劑組分是否完整。如有產(chǎn)品包裝破損或質(zhì)量投訴，請(qǐng)?jiān)谑盏截浺粋€(gè)月之內(nèi)聯(lián)系我們。

IL-1β簡介：

白介素-1又稱淋巴細(xì)胞激活因子,由 IL-1α和 IL-1β兩種形式的多肽類細(xì)胞因子構(gòu)成，與許多的細(xì)胞活性相關(guān). 包括增殖、分化以及凋亡, 主要由血液中的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞所產(chǎn)生, 各種上皮細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞也能產(chǎn)生IL-1β, 但血液中的IL-1β 主要是由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞所產(chǎn)生的IL-1β。兔IL-1β的cDNA編碼268個(gè)氨基酸的前體蛋白，通過半胱氨酸IL1β轉(zhuǎn)換蛋白酶的切割，形成116個(gè)氨基酸的活性細(xì)胞因子，即17 kDa的成熟IL1β，兔IL-1β與人，小鼠和大鼠的IL-1β有78%～81%的氨基酸同源性。

由激活巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的IL-1β，經(jīng)蛋白酶-1酶解活化后，成熟的白介素-1分子可以誘導(dǎo)白介素-2的釋放、促進(jìn)B細(xì)胞成熟與增殖、誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞生長因子活性，通過這些影響可以刺激胸腺細(xì)胞增殖，進(jìn)而影響機(jī)體的免疫反應(yīng)。研究表明白介素-1蛋白與炎癥初始反應(yīng)相關(guān)，起到調(diào)節(jié)因子的作用，通常被認(rèn)為是內(nèi)源性致熱原；

細(xì)菌的內(nèi)毒素或者一些非細(xì)菌的炎癥因子都會(huì)誘導(dǎo)IL‐1產(chǎn)生，然后被釋放到局部組織，IL-1β含量升高表明機(jī)體內(nèi)有組織損傷或者感染產(chǎn)生, 如敗血癥等。對(duì)IL-1β的研究主要集中在各種生理和病理免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)過程領(lǐng)域。

檢測原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣本中兔IL-1β的濃度。兔IL-1β捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)本或參考品時(shí)，其中的兔IL-1β會(huì)與捕獲抗體結(jié)合，其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。當(dāng)加入生物素化的抗兔IL-1β抗體后，抗兔IL-1β抗體與兔IL-1β結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物，其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素。生物素與親合素特異性結(jié)合，親合素連接的酶就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來；其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。最后加入顯色劑，若樣本中存在IL-1β將會(huì)形成免疫復(fù)合物，辣根過氧化物酶會(huì)催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測，讀其450nm處的OD值，兔IL-1β濃度與OD₄₅₀值之間成正比，通過參考品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照未知樣本中OD值，即可算出標(biāo)本中IL-1β濃度。

兔IL-1β定量分析酶聯(lián)免疫檢測試劑盒組成:

標(biāo)本收集:

1.標(biāo)本的收集請(qǐng)按下列流程進(jìn)行操作；

A.細(xì)胞上清標(biāo)本離心去除懸浮物后即可；

B.血清標(biāo)本應(yīng)是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；

C.血漿標(biāo)本，推薦用EDTA的方法收集

D.若待測樣本不能及時(shí)檢測，標(biāo)本收集后請(qǐng)分裝，凍存于－20℃，避免反復(fù)凍融。

2.血清標(biāo)本不應(yīng)添加任何防腐劑或抗凝劑；

3.標(biāo)本應(yīng)清澈透明，檢測前樣本中如有懸浮物應(yīng)通過離心去除。

4.請(qǐng)勿使用溶血，高血脂或污染的標(biāo)本檢測，否則結(jié)果將不準(zhǔn)確。

注：兔血清或血漿樣本請(qǐng)用樣本分析緩沖液做倍比稀釋后再檢測。

注意事項(xiàng):

1.試劑盒請(qǐng)保存在2～8℃。

2.濃縮洗滌液因在低溫下可能有結(jié)晶，請(qǐng)水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。

3.標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶加樣后，剩余部分請(qǐng)丟棄。

4.底物請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬。

5.加樣時(shí)，請(qǐng)及時(shí)更換槍頭，避免交叉污染。

6.嚴(yán)禁混用不同批號(hào)的試劑盒組分。

7.充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的準(zhǔn)確性很重要，在加液后請(qǐng)輕輕叩擊邊緣以保證混勻。

8.室溫反應(yīng)，請(qǐng)嚴(yán)格控制在25～28℃。

9.洗滌過程是至關(guān)重要的，洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。

10.試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時(shí)建議作雙復(fù)孔。

11.加樣過程中避免氣泡的產(chǎn)生。

12.血清和血漿標(biāo)本的檢測時(shí)，檢測抗體的孵育時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長。

檢測前準(zhǔn)備工作:

1.試劑盒自冰箱中取出后應(yīng)置于室溫（25-28℃）平衡20分鐘；每次檢測后剩余試劑請(qǐng)及時(shí)于2～8℃保存。

2.將濃縮洗滌液用雙蒸水或去離子水稀釋(1份加19份水)。

3. 如有5×標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液用雙蒸水或去離子水稀釋(1份加4份水)。

4.標(biāo)準(zhǔn)品:按標(biāo)簽復(fù)溶體積用1X標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液復(fù)溶使IL-1β終濃度達(dá)到1200pg/ml，室溫反應(yīng)，請(qǐng)嚴(yán)格控制在25～28℃，靜置15～20分鐘后輕輕混勻（建議抽吸幾次）待徹底溶解，用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液倍比梯度稀釋后依次加入檢測孔中。（標(biāo)準(zhǔn)曲線取七個(gè)點(diǎn)，最高濃度為1200pg/ml,標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接加入作為0濃度.）

本試劑盒僅供科研使用。用于體外定量檢測兔血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-1β濃度。使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書并檢查試劑組分是否完整。如有產(chǎn)品包裝破損或質(zhì)量投訴，請(qǐng)?jiān)谑盏截浺粋€(gè)月之內(nèi)聯(lián)系我們。如有其他疑問請(qǐng)登錄安徽巧伊生物科技有限公司網(wǎng)站或致電本公司。

IL-1β簡介：

白介素-1又稱淋巴細(xì)胞激活因子,由 IL-1α和 IL-1β兩種形式的多肽類細(xì)胞因子構(gòu)成，與許多的細(xì)胞活性相關(guān). 包括增殖、分化以及凋亡, 主要由血液中的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞所產(chǎn)生, 各種上皮細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞也能產(chǎn)生IL-1β, 但血液中的IL-1β 主要是由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞所產(chǎn)生的IL-1β。兔IL-1β的cDNA編碼268個(gè)氨基酸的前體蛋白，通過半胱氨酸IL1β轉(zhuǎn)換蛋白酶的切割，形成116個(gè)氨基酸的活性細(xì)胞因子，即17 kDa的成熟IL1β，兔IL-1β與人，小鼠和大鼠的IL-1β有78%～81%的氨基酸同源性。

由激活巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的IL-1β，經(jīng)蛋白酶-1酶解活化后，成熟的白介素-1分子可以誘導(dǎo)白介素-2的釋放、促進(jìn)B細(xì)胞成熟與增殖、誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞生長因子活性，通過這些影響可以刺激胸腺細(xì)胞增殖，進(jìn)而影響機(jī)體的免疫反應(yīng)。研究表明白介素-1蛋白與炎癥初始反應(yīng)相關(guān)，起到調(diào)節(jié)因子的作用，通常被認(rèn)為是內(nèi)源性致熱原；

細(xì)菌的內(nèi)毒素或者一些非細(xì)菌的炎癥因子都會(huì)誘導(dǎo)IL‐1產(chǎn)生，然后被釋放到局部組織，IL-1β含量升高表明機(jī)體內(nèi)有組織損傷或者感染產(chǎn)生, 如敗血癥等。對(duì)IL-1β的研究主要集中在各種生理和病理免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)過程領(lǐng)域。

檢測原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣本中兔IL-1β的濃度。兔IL-1β捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)本或參考品時(shí)，其中的兔IL-1β會(huì)與捕獲抗體結(jié)合，其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。當(dāng)加入生物素化的抗兔IL-1β抗體后，抗兔IL-1β抗體與兔IL-1β結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物，其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素。生物素與親合素特異性結(jié)合，親合素連接的酶就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來；其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。最后加入顯色劑，若樣本中存在IL-1β將會(huì)形成免疫復(fù)合物，辣根過氧化物酶會(huì)催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測，讀其450nm處的OD值，兔IL-1β濃度與OD₄₅₀值之間成正比，通過參考品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照未知樣本中OD值，即可算出標(biāo)本中IL-1β濃度。

兔IL-1β定量分析酶聯(lián)免疫檢測試劑盒組成:

標(biāo)本收集:

1.標(biāo)本的收集請(qǐng)按下列流程進(jìn)行操作；

A.細(xì)胞上清標(biāo)本離心去除懸浮物后即可；

B.血清標(biāo)本應(yīng)是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；

C.血漿標(biāo)本，推薦用EDTA的方法收集

D.若待測樣本不能及時(shí)檢測，標(biāo)本收集后請(qǐng)分裝，凍存于－20℃，避免反復(fù)凍融。

2.血清標(biāo)本不應(yīng)添加任何防腐劑或抗凝劑；

3.標(biāo)本應(yīng)清澈透明，檢測前樣本中如有懸浮物應(yīng)通過離心去除。

4.請(qǐng)勿使用溶血，高血脂或污染的標(biāo)本檢測，否則結(jié)果將不準(zhǔn)確。

注：兔血清或血漿樣本請(qǐng)用樣本分析緩沖液做倍比稀釋后再檢測。

注意事項(xiàng):

1.試劑盒請(qǐng)保存在2～8℃。

2.濃縮洗滌液因在低溫下可能有結(jié)晶，請(qǐng)水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。

3.標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶加樣后，剩余部分請(qǐng)丟棄。

4.底物請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬。

5.加樣時(shí)，請(qǐng)及時(shí)更換槍頭，避免交叉污染。

6.嚴(yán)禁混用不同批號(hào)的試劑盒組分。

7.充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的準(zhǔn)確性很重要，在加液后請(qǐng)輕輕叩擊邊緣以保證混勻。

8.室溫反應(yīng)，請(qǐng)嚴(yán)格控制在25～28℃。

9.洗滌過程是至關(guān)重要的，洗滌不充分會(huì)使精確度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。

10.試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時(shí)建議作雙復(fù)孔。

11.加樣過程中避免氣泡的產(chǎn)生。

12.血清和血漿標(biāo)本的檢測時(shí)，檢測抗體的孵育時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長。

檢測前準(zhǔn)備工作:

1.試劑盒自冰箱中取出后應(yīng)置于室溫（25-28℃）平衡20分鐘；每次檢測后剩余試劑請(qǐng)及時(shí)于2～8℃保存。

2.將濃縮洗滌液用雙蒸水或去離子水稀釋(1份加19份水)。

3. 如有5×標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液用雙蒸水或去離子水稀釋(1份加4份水)。

4.標(biāo)準(zhǔn)品:按標(biāo)簽復(fù)溶體積用1X標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液復(fù)溶使IL-1β終濃度達(dá)到1200pg/ml，室溫反應(yīng)，請(qǐng)嚴(yán)格控制在25～28℃，靜置15～20分鐘后輕輕混勻（建議抽吸幾次）待徹底溶解，用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液倍比梯度稀釋后依次加入檢測孔中。（標(biāo)準(zhǔn)曲線取七個(gè)點(diǎn)，最高濃度為1200pg/ml,標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接加入作為0濃度.）

靈敏度，特異性和重復(fù)性：

1.靈敏度：多次重復(fù)結(jié)果表明，最小檢出量為14.4pg/ml。

2.特異性：與兔IL-2，IL-4，小鼠IL-1β，大鼠IL-1β等沒有交叉反應(yīng)。

3.重復(fù)性：板內(nèi)，板間變異系數(shù)均〈10%.

參考文獻(xiàn)：

1. Dinarello, C.A. (2009) Annu. Rev. Immunol. 27:519.

2. Cannon, J.G. et al. (1989) J. Immunol. 142:2299.

3. Weber, A. et al. (2010) Sci. Signal. 3:cm1.

4. Boraschi, D. and A. Tagliabue (2006) Vitam. Horm. 74:229.

5. Martinon, F. and J. Tschopp (2007) Cell Death Differ. 14:10.